GeneAce Probe qPCR Mix II

リアルタイムPCR用試薬(蛍光標識プローブ検出系)
品名 Code No. 包装単位 価格 備考
GeneAce Probe qPCR Mix II 317-08821 50反応用 11,000円  
GeneAce Probe qPCR Mix II 313-08823 200反応用 24,000円  

製造元 (株)ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

製品説明


GeneAce Probe qPCR Mix II 200反応用

GeneAce Probe qPCR Mix II は、リアルタイムPCR 用サーマルサイクラー(プレートタイプ)に対応した蛍光標識プローブ検出系のリアルタイムPCR用マスターミックス(2 x 濃度)です。
試薬が小分け分注されており、操作性に優れています。化学的な修飾を施されたホットスタートPCR用酵素を採用しており、非特異的増幅を抑制し、広範囲の鋳型濃度に対し精度の高い分析ができます。 また、別途Uracil-N-Glycosylase(UNG) を添加することでキャリーオーバー防止処理を行えます (本品にUNG は含まれていません)。
本品は、パッシブリファレンス色素が予め添加されているため、各種プレートタイプのリアルタイムPCR 装置に対応しています。

特長

・ 圧倒的コストパフォーマンス(120円/50 µl反応系) ・ 高い特異性と増幅効率 ・ SNPジェノタイピング実験に使用可能 ・ UNGを別途添加してキャリーオーバー防止処理が可能 ・ 各種プレートタイプのリアルタイムPCR装置に対応

▲このページのトップへ

製品内容

使用回数

包装単位は50 µl反応系での使用回数です。

保存方法

-20°C(遮光)
4°C保存も可能ですが、1 ヶ月以内にご使用下さい。

・GeneAce Probe qPCR Mix II
構成品 200反応用 50反応用 形状
2 x GeneAce Probe qPCR Mix II 1.25 ml x 4 1.25 ml x 1 Hot-Start GeneTaq NT, dNTP Mixture (including dUTP)*1, Mg2+, stabilizers, Passive Reference dye*2
*1 本品にUNGは含まれておりません。別途UNGを添加することでキャリーオーバー防止処理を行えます。
*2 パッシブリファレンス色素が予め添加されているため、ROX補正の有無にかかわらず各種装置に対応しています。  例)Applied Biosystems 7300/7700/7900HT, StepOne, Applied Biosystems 7500, ViiA, QuantStudio, Roche LightCycler 480 System, 等

▲このページのトップへ

使用例

反応液組成(例)
2X GeneAce Probe qPCR Mix II 25 μl 12.5 μl (final conc. 1X)
25 μM Forward Primer 1 μl 0.5 μl  
25 μM Reverse Primer 1 μl 0.5 μl  
10 μM TaqMan® Probe 1 μl 0.5 μl  
Template DNA 5 μl 2.5 μl  
ddWater up to 50 μl up to 25 μl  

推奨PCR サイクル条件
95°C 10分 1サイクル 酵素活性化ステップ
95°C 30秒 45サイクル  
60°C 1分

・ 泡立てないように穏やかに転倒混和し、試薬を十分均一にしてからご使用下さい。
・ ご使用の装置に対応した反応液量でご使用下さい。
・ プライマーの設計や鋳型DNA 等により反応の至適条件が変わることがあります。
・ TaqMan®は、Roche Molecular systems 社の商標です。
・ プライマー対とプローブの設計によっては、熱変性時間は15 秒まで、伸長時間は30 秒まで短くすることもできます。
・ 反応液に別途UNG を添加した場合、酵素活性化ステップの前にUNG 処理を行えます。

実験例1 GeneAce Probe qPCR Mix II と他社製品の比較

ISOSPIN Cell & Tissue RNAを用いてHeLa細胞から抽出したTotal RNAから、GeneAce Reverse Transcriptaseを使用してcDNAを合成し、従来品(GeneAce Probe qPCR Mix α Low ROX)およびC社製品と増幅効率を比較した。

Template: 
cDNAの段階希釈(RNA 相当量: 10 ng, 1 ng, 100 pg, 10 pg, 1 pg)
PCR condition: 
95°C 10分→(95°C 30秒→60°C 1分) x 45サイクル
Target: 
β-actin 一部領域
PCR volume: 
25 μl
装置: 
Applied Biosystems 7500 Fast Real Time PCR System

結果  本品は、従来品およびC社製品と比較して最も早い立ち上がりを示した。検量線もCt値のばらつきが少なく高い直線性の結果が得られた。

実験例2 SNPジェノタイピング実験例

GeneAce Probe qPCR Mix II と FAMおよびVIC色素を使用した TaqMan MGB プローブ検出系試薬を用いて、31サンプルのヒト血液から抽出したゲノムDNAを鋳型にして(各2.5 ng/10 μl反応系)、β3AR遺伝子をターゲットにSNPジェノタイピング解析を行った。

SNPアッセイ: 
TaqMan MGBプローブ検出系(FAM/VIC)
Template: 
ヒト血液ゲノムDNA(31人)
PCR condition: 
95°C 10分→(95°C 30秒→60°C 1分) x 40サイクル
Target: 
β3AR遺伝子
PCR volume: 
10 μl
装置: 
Applied Biosystems 7500 Fast Real Time PCR System

 

赤:野生型T/Tホモ(23人)
緑:T/Cヘテロ(6人)
青:変異型C/Cホモ(2人)
灰:鋳型DNAを含まないコントロール(NTC)

結果

GeneAce Probe qPCR Mix II を使用してSNPジェノタイピング解析を行うことができた。


▲このページのトップへ

Q & A

【基礎編】

全てのリアルタイムPCR装置で使用可能ですか?
使用期限は?
反応容量のスケールダウンは可能か?
凍結融解による活性への影響はありますか?

【トラブルシューティング編】

増幅の立ち上がりが遅い。

▲このページのトップへ

資料 Data Sheet

製品マニュアル

SDS(Safety Data Sheet)

リーフレット

▲このページのトップへ

関連情報

備考

関連製品

問い合わせ先

購入に関するお問い合わせ先
富士フイルム和光純薬株式会社および同社代理店・特約店
製品に関するお問い合わせ先
株式会社ニッポンジーン 学術営業課

ページトップ