ISOHAIR EASY

毛根からのDNA抽出キット
品名
Code No.
包装単位
価格
備考
ISOHAIR EASY
319-07781
100回分
15,000円

製造元 (株)ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

製品説明

本品(アイソヘアーイージー)は、毛根から簡便にDNA を抽出するための試薬です。
抽出したDNA 溶液は、精製をしないでそのまま核酸増幅法の鋳型として利用することができます。

特長

ヒトの毛根からDNA抽出が可能操作が簡便で約30分間で抽出可能

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製品内容

ISOHAIR EASY (100回分)
構成品 容量 保存 備考
ISOHAIR EASY
1,000 μl x 5本
-20°C  

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使用例

検体の準備(エタノールによる毛髪の洗浄)


ISOHAIR EASYの検体例

  1. 毛髪3本(毛根付)を採取し、毛根部から1.5 cm程度にハサミ等で切断する。
    ※採取した毛髪に毛根があることを確認(右図)。*1
  2. エタノールを300 μl注いだ1.5 ml容チューブの中に、ピンセット*2 で毛根部を3本入れる。
  3. 数回転倒混和して簡単に洗う。毛根部を取り出した後、ろ紙やキムワイプなどの上にのせてエタノールを蒸発させる。

核酸の抽出

  1. ISOHAIR EASYを室温に置いて融解し、転倒混和で均一にした後、スピンダウンして氷上に静置する。
  2. 0.2 ml容チューブにISOHAIR EASYを50 μl注ぎ、準備した毛根部3本をチューブの中に入れる。
  3. インキュベート
    55°C、20分間インキュベート*3
    94°C、10分間インキュベート
    氷上に置いて速やかに4°Cに冷却
  4. ピペッティングして混合した後、不溶物を取らないように上清を1.5 ml容チューブに移し、DNA抽出液とする。*4
    ※本品の使用で、毛髪3本から1~6.5 ng/μl のDNAが抽出されることを確認しております。*5

Data 1: リアルタイムPCR法の利用

ISOHAIR EASYを用いてA、B、C 3人の毛髪各3本から調製したDNA抽出液 2 μlを鋳型にして、GeneAce SYBR® qPCR Mix α No ROXを用いてリアルタイムPCRを行い、Gap遺伝子(GAPDH)を検出した。(装置:LightCyclerR 96)

反応液組成

2×GeneAce SYBR®qPCR Mix α No ROX 12.5 µl
Primers (5 µM each) 2.0 µl
DNA抽出液(毛根ゲノムDNA) 2.0 µl
d.d.H2O up to 25.0 µl

反応条件

95°C 10 min. 酵素の活性化処理
95°C 30 sec. 45サイクル
60°C 1 min.  
  ↓    
融解曲線解析

<結果>

融解曲線
 
 
検量線
 
検量線コントロールとしてHuman genomic DNA(Clontech社)を使用。

 

Data 2: LAMP法の利用

ISOHAIR EASYを用いてA、B 2人の毛髪各3本から調製したDNA抽出液4 μlを鋳型に、Isothermal Master Mixを用いてLAMPプライマーセットで標的領域(IL28B遺伝子)の増幅を行い、その増幅産物に対して会合曲線解析を行った。(装置:Genie® II)

Isothermal Master Mix 15.0 µl
LAMP Primers 2.5 µl
DNA抽出液(毛根ゲノムDNA) 4.0 µl
d.d.H2O up to 25.0 µl
  ↓
増幅 63°C、60分間
会合曲線解析 98°C-75°C、0.05°C/秒

<結果>

融解曲線
Annealing Derivative
注) LAMP法は、標的遺伝子に対する4種類のプライマーと鎖置換型DNA 合成酵素を用いて、一定温度(65°C付近)で反応させる遺伝子増幅法であり、高い増幅効率と特異性を特長とします。 LAMP法は、栄研化学株式会社が特許を保有しております。

 

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Q & A

ISOHAIR(Code No. 315-03403)とISOHAIR EASY(Code No. 319-07781)の違いは?

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資料 Data Sheet

製品マニュアル

SDS(Safety Data Sheet)

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関連情報

備考

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問い合わせ先

購入に関するお問い合わせ先
富士フイルム和光純薬株式会社および同社代理店・特約店
製品に関するお問い合わせ先
株式会社ニッポンジーン 学術営業課

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