Cas3 protein NLS

Cas3 プロテイン NLS
CRISPR-Cas3ゲノム編集
品名 Code No. 包装単位 価格 備考
Cas3 protein NLS 311-09441 150 µg 90,000円  
 

製造元　（株）ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

製品説明

本品は、Escherichia coli由来のCas3タンパク質です。Cas3遺伝子を有する組換えバキュロウイルスに感染した昆虫細胞を用いて発現させたタンパク質で、アフィニティ精製を経たものとなります。
核移行シグナル (NLS) を有しており、ガイドRNA (Cascade-crRNA複合体) と組み合わせることでCRISPR-Cas3ゲノム編集に利用することができます。

特長

・15 µg/µLの高濃度品
・核移行シグナル (NLS) を付加
・CRISPR-Cas3ゲノム編集でゲノムの大規模欠損が可能

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製品内容

Cas3 プロテイン NLS
構成品 容量 保存 備考
Cas3 protein NLS 150 µg x 1本 -20°C 起源：遺伝子組換えバキュロウイルス
分子量：103,700
濃度：15 µg/µL Cas3 protein NLS
形状：20 mM HEPES-NaOH (pH 7.0), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 50％ Glycerol

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使用例

使用例1　in vitro での切断チェック

反応液組成
Cas3 protein NLS 0.5 µg
Cascade-crRNA複合体 1.6 µg
5 x Reaction Buffer *1 4 µl
50 mM ATP 1 µl
基質DNA *2 100 ng
d.d.H2O up to 20 µl

37°C、5分間

アガロースゲル電気泳動*3

*1　5 x Reaction Buffer組成：25 mM HEPES-KOH (pH 7.5), 300 mM KCl, 50 mM MgCl2, 50 µM CoCl2
*2　基質DNAはPAM配列(AAG)と32塩基の認識配列を含みます。
*3　正確な泳動結果を得るため、SDSを含むLoading Buffer（Code No. 313-90111など）の使用をお勧めします。

使用例2　in vitro での基質DNAの切断確認

Cas3 protein NLS および Cascade-crRNA複合体を用いて、PAMと標的配列を含むPlasmid DNAの切断確認を行った。

＜反応系＞
5 mM HEPES-KOH (pH 7.5),
60 mM KCl,
10 mM MgCl2,
10 µM CoCl2
2.5 mM ATP,
0.24 µM Cas3 protein NLS,
0.20 µM Cascade-crRNA複合体,
100 ng Plasmid DNA

＜反応条件＞
37°C、5分間反応
↓
SDS含有のLoading Buffer(Code No. 313-90111)を添加し、
アガロースゲル電気泳動
1% Agarose S
M : Gene Ladder Fast 2

[参考文献]　Yoshimi, K. et al.:Nature Communications, 13:4917 （2022）

結果　PAMおよび標的配列を含むPlasmid DNA（レーン１）において切断を確認した。一方、非標的配列を含むPlasmid DNA（レーン3）において切断は確認されなかった。

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資料 Data Sheet

製品マニュアル

SDS(Safety Data Sheet)

リーフレット

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関連情報

ライセンス

備考

関連製品

問い合わせ先

購入に関するお問い合わせ先
富士フイルム和光純薬株式会社および同社代理店・特約店
富士フイルム和光純薬株式会社　製品検索サイト
製品に関するお問い合わせ先
株式会社ニッポンジーン　学術営業課

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