Bst DNA Polymerase
鎖置換型酵素| 品名 | Code No. | 包装単位 | 価格 | 備考 |
|---|---|---|---|---|
| Bst DNA Polymerase | 311-07481 | 1,600 units | 11,000円 |
製造元（株）ニッポンジーン
表示価格は希望納入価格 (税別) です。
製品説明
本品は、5’→ 3’DNA ポリメラーゼ活性と鎖置換活性を有し、鋳型となる二本鎖DNA の水素結合を自ら解離しつつ、新しいDNA 鎖を合成する酵素です。耐熱性鎖置換型DNA ポリメラーゼは、その特性から二本鎖DNA の解離を必要としないため、一定温度でのDNA 合成が可能であり、またDNA の二次構造による合成阻害を受けません。
特長
・5’→ 3’DNA ポリメラーゼ活性および鎖置換活性を有する・一定温度でのDNA合成が可能・GC含量が高いDNA鎖の合成に適している・DNAの二次構造による阻害を受けない
用途
- 鎖置換活性を利用したアプリケーション（等温遺伝子増幅法など）
至適反応温度 |
60°C～ 65°C |
|---|---|
失活時間*1 |
80°C、5 分間 |
*1 酵素原液をそのまま直接熱変性した場合の失活温度
| 起源 | Geobacillus stearothermophilus |
|---|---|
| 活性 | 8 units/μl |
| 単位の定義 | 1 unit は、仔牛胸腺DNA をプライマー/ 鋳型として、65°C、30 分間に10 nmol のdNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性とする。 |
| 形状 | 10 mmol/l Tris-HCl（pH 7.5）, 1 mmol/l DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/l EDTA, 50% Glycerol |
| 酵素反応条件 | 10 倍濃度の酵素反応専用バッファー（0.5 ml × 1 本）を添付している。例えば、反応容量が50 μl の場合には酵素反応専用バッファー5 μl を加える。 |
| 備考 | アプリケーションによっては、ライセンスが必要となる場合があります。 |
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製品内容
| 構成品 | 容量 | 保存 | 備考 |
|---|---|---|---|
| Bst DNA Polymerase（8 units/μl） |
200 μl x 1 | -20°C | |
| 10 × Bst Reaction Buffer（80 mmol/l Mg2+） | 500 μl x 1 | -20°C |
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使用例
実験例1 LAMP法への利用
3.0% Agarose 21
TAE ゲル電気泳動
エチジウムブロマイド染色
M：
Gene Ladder Wide 1
1： A 社 Bst DNA Polymerase
2： 当社 Bst DNA Polymerase
Candidatus Liberibacter asiaticus DNA |
1 x 106 copies |
FIP* |
40 pmol |
BIP* |
40 pmol |
F3 Primer* |
5 pmol |
B3 Primer* |
5 pmol |
Loop Primer F* |
20 pmol |
Loop Primer B* |
20 pmol |
dNTPs Mixture |
1.4 mM each |
10 × Bst Reaction Buffer |
2.5 µl |
Bst DNA Polymerase |
8 units |
Total |
25 µl |
| 65°C | 60分間 |
|---|
| * プライマー配列 | |
| FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3' BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3' F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3' B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3' Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3' Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3' |
|
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実験例2 RCA法によるBst DNA Polymeraseの耐熱性と至適反応温度の評価
M13mp18 single strand DNA |
40 ng |
Universal primer |
50 nM |
dNTPs Mixture |
1.4 mM each |
Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C) |
20 mM |
KCl |
10 mM |
(NH4)2SO4 |
10 mM |
MgSO4 |
8 mM |
Tween 20 |
0.1% |
Betain |
0.8 M |
Bst DNA Polymerase |
4 units |
全量 |
20 µl |
| 各温度にて | 30分間 |
|---|
結果
 |
レーン |
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資料 Data Sheet
製品マニュアル
SDS(Safety Data Sheet)
リーフレット
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関連情報
備考
- 本品は試験研究用試薬です。医薬品の用途には使用しないでください。
- Candidatus Liberibacter asiaticus を検出するための LAMP プライマーセットは、先端技術を活用した農林水産研究高度化事業「難防除病害カンキツグリーニング病の拡大阻止技術の開発」において、国立研究開発法人 農業・食品産業技術総合研究機構 九州沖縄農業研究センターによって開発されました。
License
- LAMP（Loop-mediated Isothermal Amplification）法は栄研化学株式会社が特許を保有しています。
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