ISOPLANT

植物・酵母・細菌からのDNA抽出キット

細菌からのDNA抽出

Data 1. 抽出DNA の収量と純度

 
ISOPLANT
phenol/chloroform法
yeild (µg/g)
A260/280
yeild (µg/g)
AA260/280
Anabaena variabilis
125-500
1.8
60-500
1.7
Bacillus amyloliquefaciens
250-500
1.8
1000
1.8
Bacillus subtilis
100
1.8
−
−
Escherichia coli
125-500
1.8
250
1.8
Haemophilus influenzae
250-1000
1.8
250
1.7
Nocardia corallina
125
1.8
125
1.7
Pseudomonas aeruginosa
80-125
1.8
−
−
Staphylococcus aureus
125
1.9
125
1.7
Streptomyces phaeochromogenes
500
1.7
250
1.7
Thermus aquaticus
500
1.8
500
1.7
Xanthomonas holcicola
100
1.8
500
1.7

 

Data 2. 抽出DNAの制限酵素反応

抽出DNAは、制限酵素(EcoRI及びHindIII)で切断できることを確認した。

lane 1: Escherichia coli JM109
lane 2: Staphylococcus aureus 3A
lane 3: Pseudomonas aeruginosa
a: intact
b: EcoRI digest
c: HindIII digest
M: Marker 6 (λ/StyI digest)

Data 3. 抽出DNAのPCR

抽出DNAを鋳型として、tobacco ribulose-1,5-diphosphate carboxylase large subunit gene を増幅するプライマーを用いたPCRにて、特異的なバンドを増幅できることを確認した。

lane 1: Escherichia coli JM109
lane 2: Bacillus amyloliquefaciens
lane 3: Bacillus subtilis
lane 4: Staphylococcus aureus 3A
M: Marker 6 (λ/StyI digest)

 


1. 植物からのDNA抽出
3. 酵母からのDNA抽出
4. 放線菌、カビからのDNA抽出
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