ISHR Starting Kit

in situ ハイブリダイゼーション用試薬

品名	Code No.	包装単位	価格	備考
ISHR Starting Kit	~~314-02611~~	~~1 kit~~	~~75,000円~~	2020年9月販売終了

製造元　（株）ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

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製品説明

本品は、in situ hybridization（ISH）を初めて行う研究者のためのパラフィン包埋組織切片専用の練習用キットです。
RNA プローブ調製用試薬、ISH 用試薬およびコントロールとして使用できるプローブ用鋳型DNA、組織切片が含まれています。研究者が用意した試料のISH も同時に行うことができます。

in situ hybridization（ISH）法は、スライドガラスに固着させた組織切片上で核酸－核酸ハイブリダイゼーションにより、特定の核酸の局在性部位を決定する方法です。特にRNA プローブを用いたISH法は、シグナル/ ノイズ比の改良に大変有用です。しかし、RNA プローブを用いる場合は、操作中での混入や試料中に存在するRNase により組織切片のmRNA やRNA プローブ自体が分解され易いので、注意深い実験操作が要求されます。
本品は、RNA プローブを用いたISH を行う場合の組織切片の脱パラフィン、前処理からハイブリダイゼーションおよび洗浄までに必要な調製液を含んでおり、面倒なRNase 対策や調製液の希釈操作などは不要です。

特長

パラフィン包埋組織切片専用の練習用キット RNA プローブを用いたin situ hybridization（ISH）法

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製品内容

使用回数

スライドガラス最大 20枚 x 2 回分
切片のサイズや数によって必要な試薬量が変わります。不足分については単品でご購入下さい。

ISHR Starting Kit (1 kit)
構成品	容量	保存	備考
コントロール用組織切片スライドグラス	4 枚	2 - 10°C	マウス (雄) アダルト顎下腺
コントロールプローブ調製用鋳型DNA（直鎖状）	1 set	-20°C	マウス神経成長因子 (NGF) 遺伝子 (1 µg/µl) ・アンチセンスプローブ用: 2 μl x 1 ・センスプローブ用: 2 μl x 1
アルカリ加水分解バッファー	800 μl x 1	室温	0.1 M 炭酸ナトリウム (pH 10.2)
Ethachinmate	1 set	2 - 10°C	・ Ethachinmate: 10 μl x 1 ・ 3 M Sodium Acetate (pH 5.2): 100 μl x 1
RNA Synthesis Set	1 set	-20°C	・ 5X RNA Polymerase buffer: 20 μl x 1 ・ 250 mM NaCl: 10 μl x 1 ・ 10 mM rATP: 5 μl x 1 ・ 10 mM rGTP: 5 μl x 1 ・ 10 mM rCTP: 5 μl x 1 ・ 10 mM rUTP: 5 μl x 1 ・ RNase Inhibitor: 5 μl x 1 ・ SP6 RNA Polymerase: 5 μl x 1 ・ T3 RNA Polymerase: 5 μl x 1 ・ T7 RNA Polymerase: 5 μl x 1 ・ DNase (RT-Grade): 5 μl x 1 ・ RNase free Water: 500 μl x 1
ISHR 1　 PBS Buffer	800 ml x 2	室温	0.1 M NaCl, 10 mM りん酸ナトリウム (pH 7.4)
ISHR 2 　PBS (Glycine) Buffer	400 ml x 1	室温	0.1 M NaCl, 10 mM りん酸ナトリウム (pH 7.4), 2 mg/ml Glycine
ISHR 3　 Acetylation Buffer	800 ml x 1	室温	0.1 M Triethanolamine (pH 8.0)
ISHR 4　 Acetic anhydride	1 ml x 2	室温遮光	Acetic anhydride 無水酢酸は、医薬用外劇物と特麻原（特定麻薬原料及び向精神薬原料）に指定されています
ISHR 5　 4X SSC	1 L x 2	室温	0.6M NaCl, 0.06M Sodium citrate
ISHR 6　 Proteinase K Solution	200 μl x 1	-20°C	10 mg/ml Proteinase K
ISHR 7　 Hybridization Buffer	93 μl x 8	-20°C	50% Formamide, 2X SSC, 1 µg/µl tRNA, 1 µg/µl Salmon sperm DNA, 1 µg/µl BSA, 10% Dextran sulfate
ISHR 8　 1.2 mol/l DTT Solution	100 μl x 1	-20°C	1.2M DTT
ISHR 9　 NTE Buffer	800 ml x 1	室温	0.5M NaCl, 10mM Tris-HCl (pH 8.0), 1mM EDTA
ISHR 10　 RNase A Solution	400 μl x 2	-20°C	10 mg/ml RNase A
ISHR 11　 0.1X SSC	600 ml x 2	室温	15 mM NaCl, 1.5 mM Sodium citrate

ISHR Starting Kit には、以下の試薬は含まれておりません。

固定液、組織包埋用試薬、スライドコーティング用試薬、エタノール、キシレン、ホルムアミド、ジゴキシゲニン（DIG）標識および検出用試薬、染色試薬、オートラジオグラフィー用試薬

輸送方法

ニッポンジーンから直送する場合、－20℃品とドライアイスを入れたスチロールボックスと室温品を一つの段ボール箱にまとめて入れて常温で輸送しています。

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Q & A

このキットに凍結組織切片プロトコールはありますか？: 本キットマニュアルに凍結組織切片プロトコールは掲載しておりませんが、参考文献の野地澄晴編 : 実験医学別冊「免疫染色・in situ ハイブリダイゼーション」で紹介されています。
このキットで DNA プローブは使用できますか？: 残念ながら弊社では試したことがなく知見がございません。もし本キットを応用される場合には、hybridization の温度条件など細やかな条件検討が必要となり、マニュアルの系そのままではご利用できません。

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