ISOSPIN Blood & Plasma DNA

全血、血清、血漿からのDNA抽出キット

HeLa 細胞からのゲノム DNA 抽出（改変プロトコール）

本キットのプロトコールを改変することで、HeLa細胞（1 x 10⁶ cells）からゲノムDNA抽出が可能です。
改変プロトコールでは、細胞のみだと濃度が濃くなるため細胞ペレットに水を加えて希釈しており、また、Proteinase K処理の後にRNase A処理を追加しています。（99.5% Ethanol や RNase A はキットに入っておりません。別途ご用意ください。）

プロトコール

① HeLa 細胞のペレットをタッピングしてほぐしておく。Proteinase Kを20 µL加える。
② 1/2希釈したBE Bufferを500 µL加える。ボルテックスミキサーで 15 秒間撹拌し、軽くスピンダウンする。
③ 56℃で10分間加温する。
④ 0.5 mg相当のRNase A＊を加え、5分間室温で静置する。
　　＊50 µLの 10 mg/ml Ribonuclease（DNase free）Glycerol Solution または 5 µLのRNase A (100 mg/ml)が 0.5 mgに相当します。
⑤ 250 µLのエタノールを加える。完全に混和するよう、ボルテックスミキサーで 15 秒間撹拌し、軽くスピンダウンする。
⑥ 混合液を全量 Spin Column に添加する。以降は製品マニュアルのステップ⑦から同様に操作する。

改変プロトコール

結果

泳動写真

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作成日:2019年8月2日

更新日:2022年6月10日

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