品名 | Code No. | 包装単位 | 価格 | 備考 |
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GM quicker 96 | 319-07161 | 384回用 | 150,000円 |
製造元 (株)ニッポンジーン
表示価格は希望納入価格 (税別) です。
96ウェルカラムプレート
本品は、トウモロコシ種子粉砕物からDNA を抽出するためのキットです。本品は、カオトロピックイオン存在下でDNA がシリカへ吸着する原理(Boom Technology)を採用しており、抽出操作にフェノールやクロロホルムなどの毒性有機溶媒を使用しません。
本品は、抽出対象をトウモロコシ種子へ特化させることによって、96 粒の種子から約1.5 時間という短い時間で簡便に高品質なDNA を抽出することができます。使用するポリスチレン製の96 ウェルカラムプレートは、最大1800 x g までの遠心力を許容し、内封されたシリカメンブレンは、十分なDNA 吸着容量を確保しています。本品によって抽出された DNA は、PCR や制限酵素反応に適用することができます。
・トウモロコシ種子の96 サンプルから、同時に約1.5 時間で高純度のDNA が抽出可能・抽出操作にフェノールやクロロホルムなどの毒性有機溶媒が不要・抽出したDNA はPCR や制限酵素反応にそのまま使用可能
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DNA 抽出を384回(96ウェルプレート x 4枚)行うことができます。
キット構成品の一部は単品でご購入いただけます。
構成品 | 容量 | 保存 | 備考 |
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GE1 Buffer | 240 ml x 4 |
室温 |
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GE2-K Buffer | 150 ml x 1 |
室温 |
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GB3 Buffer | 120 ml x 1 |
室温 |
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GW Buffer | 150 ml x 2 |
室温 |
GW Buffer にはエタノールが含まれていますので、ご使用後は蒸発を防ぐために必ず蓋を閉めてください。 |
TE (pH8.0) | 50 ml x 1 |
室温 |
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RNase A (100 mg/ml) | 0.8 ml x 4 |
室温 /長期 冷蔵・冷凍 |
RNase A を長期間ご使用にならない場合には、冷蔵保存もしくは冷凍保存(-20°C)してください。 |
96ウェルカラムプレート | 4枚 |
冷蔵(2~10°C) |
96 ウェルカラムプレートは製品到着後、チャック式袋に密閉した状態で、冷蔵保存(2°C~10°C)して下さい。 |
1.00 mlコレクションプレート | 4枚 |
室温 |
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0.35 mlコレクションプレート | 4枚 |
室温 |
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コレクションプレートキャップ | 4枚 |
室温 |
ニッポンジーンから直送する場合、バッファーとプレートを入れたキット箱二つを段ボール箱一つにまとめて入れて常温で輸送しています。
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1. トウモロコシ種子(1粒)をフードミルまたはビーズ式破砕機等で粉砕する。
2. トウモロコシ種子粉砕物の入ったチューブに、1.5 ml のGE1 Bufferおよび 5 µl のRNase Aをそれぞれ添加する。ボルテックスミキサー等にて30 秒間攪拌する。96 サンプルを同時に抽出する場合は、240 ml のGE1 Buffer に対し、予め0.8 mlのRNase Aを添加し 混合した後すぐに、サンプルの入ったチューブへ1.5mlずつ添加しても良い。
3. 10分間、室温で静置する。
4. 180 µl のGE2-K Bufferを添加し、ボルテックスミキサー等にてよく混和する。
5. 遠心(1.4~1.8K x g, 10分間, 室温)する。
6. 上清400 µl を新しいマイクロチューブもしくは1 ml容96穴プレートに移す。
7. 250 µlのGB3 Bufferを添加し、マイクロチューブを10~12回激しく転倒させ、よく混和する。(1 ml容96穴プレートを使用する場合はピペッティング等にてよく混和する)
8. キット添付の1.00ml コレクションプレート上に96 ウェルカラムプレートをセットした後、⑦の混合液650 µl を96 ウェルカラムプレートへ移す。遠心(1.4~1.8K x g, 20 分間, 室温)した後、濾液はピペットチップで廃棄する。
9. 650 µl のGW Bufferを(1.00ml コレクションプレート上にセットした)96ウェルカラムプレートに添加し、遠心(1.4~1.8K x g, 10 分間, 室温)した後、
濾液は廃棄する。
10. 96ウェルカラムプレートを乾燥させるため、遠心(1.4~1.8K x g, 10 分間, 室温)した後、濾液は廃棄する。
11. 96ウェルカラムプレートを0.35 ml コレクションプレート上にセットする。
12. 100 µlのTE(pH8.0)を滴下した後、3分間室温にて静置する。
13. 遠心(1.4~1.8K x g, 10分間, 室温)した後、濾液を回収する。サンプルの保存には、付属のコレクションプレートキャップをご使用下さい。(コレクションプレートキャップの耐温度は、-80°C~121°C)
本キットで抽出したトウモロコシのDNAは、いずれのウェルもA260/280 = 1.8 以上であり、高純度なDNAであることが示唆された。
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