GM quicker

トウモロコシ・ダイズからのDNA抽出キット

品名	Code No.	包装単位	価格	備考
GM quicker	317-06361	50回用	38,000円

製造元　（株）ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

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製品説明

GM quicker　50回用

GM quickerは、トウモロコシやダイズなどの穀粒からDNAを抽出するためのキットです。本キットは、カオトロピックイオン存在下でDNAがシリカへ吸着する原理（Boom Technology）を採用しており、抽出操作にフェノールやクロロホルムなどの毒性有機溶媒を使用しません。遺伝子組換え作物（Genetically Modified Organisms：GMO）の検査においては、DNAを用いた方法が広く普及していますが、これまでの植物DNA抽出キットは抽出対象を「葉」としていたため、トウモロコシやダイズなどの穀粒からのDNA抽出には必ずしも効率的ではありませんでした。

本キットでは、抽出対象を穀粒へ特化させることによって、約45分間という短い時間で高い精製度のDNAを抽出することができます。また、本キットは検査用試料の調製におけるクロスコンタミネーションなど、抽出操作上の問題に配慮した設計となっています。さらに、本キットで使用するスピンカラムは、カラム容積を最大限確保しており、内封されたシリカメンブレンは、充分なDNA吸着容量と高い溶出効率を確保しています。

特長

・穀粒から約45分で高精製度のDNAを抽出可能・抽出操作にフェノールやクロロホルムなどの毒性有機溶媒が不要・試料のクロスコンタミネーション防止に配慮したキット設計・抽出したDNAはPCRや制限酵素反応にそのまま使用可能

GM quickerは、厚生労働省「平成18年6月29日付け食安発第0629002号」において「組換えDNA技術応用食品の検査方法」におけるトウモロコシ、ダイズからのDNA抽出精製方法に収載されました。

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製品内容

使用回数

トウモロコシ粉末試料1ｇの場合、DNA 抽出を50 回行うことができます。
ダイズ粉末試料1ｇでのDNA 抽出を50 回行う場合には、GE1 Buffer、GE2 Buffer およびRNase A が不足します。
不足分については単品でご購入下さい。

*GM quicker* （50回用）
構成品	容量	保存	備考
GE1 Buffer	100 ml x 3 本	室温
GE2 Buffer	37.5 ml x 1 本	室温
GB3 Buffer	12.5 ml x 1 本	室温
GW Buffer	40 ml x 1 本	室温	エタノール含有
TE (pH8.0)	10 ml x 1 本	室温
RNase A (100 mg/ml)	0.5 ml x 2 本	室温	RNase A を長期間ご使用にならない場合には、冷蔵保存もしくは冷凍保存（－20°C）して下さい。
Spin Column	50 本 x 1 袋	室温	上部パーツ：カラム、下部パーツ：Collection Tube

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使用例

使用例1　トウモロコシからのDNA抽出プロトコール

1.　トウモロコシ種子をフードミル等で粉砕し、トウモロコシ粉末試料を調製する。
2.　50 ml チューブで1.0 g のトウモロコシ粉末試料を秤量し、6 ml のGE1 Buffer および20 µl のRNase A をそれぞれ添加する。ボルテックスミキサーにて30 秒間攪拌する。
3.　10分間室温で静置する。
4.　750 µl のGE2 Buffer を添加し、10～12回チューブを激しく転倒させ、よく混和する。
5.　10 分間氷冷する。
6.　遠心（≧5K x g, 10 分間, 4°C）する。
7.　上清4 ml 程度を新しい50 ml チューブに移す。
8.　7で回収した上清から400 µl を1.5 ml マイクロチューブに移し，残った上清は4°Cで保存する。
9.　50 µl のGB3 Buffer を添加する。
10.　200 µl のエタノールを添加し、10～12 回チューブを激しく転倒させ、よく混和する。
11.　10の混合液をSpin Column に全量移し、遠心（13K x g, 30 秒間, 4°C）し、濾液は廃棄する。
12.　600 µl のGW Buffer をSpin Column に添加した後、遠心（13K x g, 60 秒間, 4°C）し、濾液は廃棄する。
13.　Spin Column を新しい1.5 ml マイクロチューブに移す。
14.　50 µl のTE（pH8.0）を滴下した後、3 分間室温で静置する。
15.　遠心（13K x g, 60 秒間, 4°C）し、濾液を回収する。

実験例：2　ダイズからのDNA抽出プロトコール

1.　ダイズ種子をフードミル等で粉砕し、ダイズ粉末試料を調製する。
2.　50 ml チューブで1.0 g のダイズ粉末試料を秤量し、12 ml のGE1 Buffer および40 µl のRNase A をそれぞれ添加する。ボルテックスミキサーにて30 秒間攪拌する。
3.　10 分間室温で静置する。
4.　1.5 ml のGE2 Buffer を添加し、10～12 回チューブを激しく転倒させ、よく混和する。
5.　10 分間氷冷する。
6.　遠心（≧5K x g, 10 分間, 4°C）する。
7.　上清8 ml 程度を新しい50 ml チューブに移す。
8.　7で回収した上清から700 µl を2.0 ml マイクロチューブに移し，残った上清は4°Cで保存する。
9.　250 µl のGB3 Buffer を添加する。
10.　250 µl のイソプロパノールを添加し、10～12 回チューブを激しく転倒させ、よく混和する。
11.　10で得られた600 µl の混合液をSpin Column に移し、遠心（13K x g, 30 秒間, 4°C）し、濾液は廃棄する。
12.　10で得られた残りの混合液全量を11のSpin Column に移し、遠心（13K x g, 30 秒間, 4°C）し、濾液は廃棄する。
13.　Spin Column に600 µl のGW Buffer を添加した後、遠心（13K x g, 60 秒間, 4°C）し、濾液は廃棄する。
14.　Spin Column を新しい1.5 ml マイクロチューブに移す。