Ethachinmate
アルコール沈殿用共沈剤（DNase，RNaseフリー）EthachinmateとLigation-Convenience Kitを併用した場合の形質転換への影響
Ethatinmateと簡易・迅速ライゲーションミックス「Ligation-Convenience Kit（Code No. 319-05961）」を上手く使用することで、ベクターやインサートが少量の場合でも効率よく実験を進めることができます。 EthachinmateとLigation-Convenience Kitを併用した場合の形質転換への影響については下記になります。
＜Ethachinmateの影響＞
実験条件 |
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|---|---|
| 条件①： | 2 μlのEthachinmateで調製したベクターやインサートを使用してライゲーション反応（16℃、5min）を開始。 20 μlの反応系から3 μlを形質転換に使用。 |
| 条件②： | ライゲーション反応後、直ちに2 μlのEthachinmateを添加してエタノール沈殿を行い、形質転換に使用。 |
| 条件③： | ライゲーション反応後、PCI（フェノール：クロロホルム：イソアミルアルコール（25：24：1））処理をした後に、2 μlのEthachinmateを添加してエタノール沈殿を行い、形質転換に使用。（その際、2μl以上のEthachinmateが持ち込まれている場合には、再度Ethachinmateを加える必要はない。） |
＜結果＞
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pUC19/EcoRⅠ＋500 bpインサート。 16℃、5min. 20 μlの反応系のうち3 μlを形質転換に使用。 |
Ethachinmateで調製したベクターやインサートを使用しても、ライゲーション反応、形質転換への悪影響はないが、ライゲーション反応後、すぐにEthachinmateを添加してエタノール沈殿を行うと、形質転換効率が低下する。 Ethachinmateでライゲーション産物を回収する場合は、ライゲーション反応後、PCI処理をしてからEthachinmateを加えることで。また、Ethachinmateが反応系に持ち込まれている場合はPCI処理後にエタノール沈殿を行って下さい。
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