<Complete RNA series> GAPDH mRNA, Human
コントロール mRNA| 品名 | Code No. | 包装単位 | 価格 | 備考 |
|---|---|---|---|---|
| <Complete RNA series> GAPDH mRNA, Human | 313-06841 | 10 μl | 32,000円 |
製造元 （株）ニッポンジーン
表示価格は希望納入価格 (税別) です。
製品説明
本品は、ヒト glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 遺伝子の全長配列を有する RNA の 5'末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を付加した均質なヒト mRNA 標品です。 本品はin vitro 転写反応により合成した均質なRNA です。5´末端にはキャップ構造を持ち、3´末端には約50 塩基のアデニンからなるpoly（A）＋配列を保持しています。Real-Time PCR 実験の絶対量コントロールやバリデーションコントロールを取るためのテンプレートとして最適です。
特長
5' 末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail をもつ高度に精製された均質なRNA世界初の生体内の mRNA を再現した単一の RNA 分子 各種遺伝子発現解析の実験プロトコールの標準化をサポート
用途
- リアルタイム定量 RT-PCR のバリデーションコントロール
- リアルタイム定量 RT-PCR の絶対量コントロール
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製品内容
保存方法
－80℃
凍結・融解の繰り返しを避けるため、小分け分注してからの保存をお奨めします。
| 構成品 | 容量 | 備考 |
|---|---|---|
| <Complete RNA series> GAPDH mRNA, Human | 10 µl x 1 | 濃度: 10 ng/μl 形状: DNase-free, RNase-free 水溶液 |
塩基配列
本製品の配列は、Cap Site cDNA dT Human Liver Tumor を鋳型とした PCR 産物に由来しております。
以下のリンクをクリックすると、塩基配列情報 (テキストファイル) をダウンロードできます。
<Complete RNA series> GAPDH mRNA, Human 配列情報 （Text 2KB）
備 考
本製品の塩基配列は、GenBank Accession No, NM_002046 (Version, NM_002046.3) の配列と以下の2箇所が異なります。
- 5'側の6塩基および3'側の14塩基は製造上の理由で付加されています。
- 1317塩基目から約50merの「a」が付加されています。
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使用例
実験例1 リアルタイム定量PCR
本製品（108 copy ～ 103 copy 相当量） を逆転写した後遺伝子特異的なプライマーとプローブを用いてリアルタイム定量 PCR を行い、 Standard Curve を作成した。
| 反応試薬 | qPCR Mastermix Plus Low ROX (Eurogentec社製，312-80431) |
|---|---|
| 使用機器 | ABI PRISM® 7500 Fast |
| 反応条件 | Detection ： 蛍光標識プローブ Reaction Volume ： 20 µl standard 7500 mode |
| Forward Primer | 5'-CCT CCC GCT TCG CTC TCT -3' |
| Reverse Primer | 5'-GCT GGC GAC GCA AAA GA-3' |
| Double-Dye Probe | 5'FAM-CCT CCT GTT CGA CAG TCA GCC GC-3'TAMRA |
| 注意 | プライマー，プローブは ニッポンジーン にて合成したものを使用しております。 本Primer-Probe配列は、Complete RNAの検量線作成の実験のみに用いるため設計しました。 そのため、残存ゲノムDNAを検出しないような領域に設計する考慮はしておりませんので、ご注意ください。 |
| 95°C | 10分 | ||
|---|---|---|---|
| 95°C | 15秒 | 40サイクル | |
| 60°C | 1分 |
Standard Curve
Slope: -3.53287
Intercept: 42.20686
R2: 0.998952
結果
R2＞ 0.99 となり高い定量性を示した。
実験例2 変性アガロースゲル電気泳動
本製品を、変性アガロースゲルにて電気泳動を行い、純度を確認した。
電気泳動条件：100V 30min, 2% Agarose S (ホルムアルデヒド変性ゲル）, EtBr染色
M： RNA Ladder (0.125 - 6.0 k base) 1 µl
1： 本製品 100 ng
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資料 Data Sheet
塩基配列
詳しくはこちらをご覧ください。
SDS(Safety Data Sheet)
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関連情報
備考
- 本品は試験研究用試薬です。医薬品の用途には使用しないでください。
- 本製品は、経済産業省/ 新エネルギー・産業技術総合開発機構（NEDO）委託研究「タンパク質機能解析プロジェクト」（H12-14）および「タンパク質機能解析・活用プロジェクト」（H15-17）の成果に基づき、独立行政法人 産業技術総合研究所・生物情報解析研究センター・発現頻度解析チームの全面的な協力のもとに開発されました。
参考文献
- 照会
関連製品
- Complete RNA シリーズ
- オリゴ合成サービス（nippongene-oligo.com）
問い合わせ先
- 購入に関するお問い合わせ先
- 富士フイルム和光純薬株式会社および同社代理店・特約店
- 富士フイルム和光純薬株式会社 製品検索サイト
- 製品に関するお問い合わせ先
- 株式会社ニッポンジーン 学術営業課
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