GM トウモロコシCBH351 定性試験用試薬（LAMP 法）

LAMP用GMO検知用試薬

品名	Code No.	包装単位	価格
LAMP 用トウモロコシ内在性DNA SSIIb プライマーミックス	319-06321	120 µl	18,800円
LAMP 用GMトウモロコシ系統別DNA CBH351 プライマーミックス	312-06311	120 µl	18,800円
LAMP 用GMトウモロコシ系統別DNA CBH351 陽性コントロールプラスミド	315-06301	50 µl	12,000円

製造元　（株）ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

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製品説明

本品は、LAMP法を用いて遺伝子組換えトウモロコシCBH351系統(StarLink; スターリンク)の検出を行う際に使用する研究用試薬です。
（PCR法を用いた遺伝子組換え食品の検知用試薬については、こちらをご参照ください。）

使用上の注意

LAMP反応は高感度な反応であるためコンタミネーションには十分ご注意下さい。増幅産物等のコンタミネーションを回避するためには可能な限り試薬及びサンプルの調製等はクリーンベンチを使用し、電気泳動などの検出を行う場所はそれ以外の別の場所で行うことをお勧めいたします。

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製品内容

保存方法

-20°C保存

LAMP 用トウモロコシ内在性DNA SSIIb プライマーミックス（120 µl）
構成品	容量	備考
LAMP 用プライマーミックス	120 µl x 1	陽性対照用

LAMP 用GMトウモロコシ系統別DNA CBH351 プライマーミックス（120 µl）
構成品	容量	備考
LAMP 用プライマーミックス	120 µl x 1	CBH351 検出用

LAMP 用GMトウモロコシ系統別DNA CBH351 陽性コントロールプラスミド　（50 µl）
構成品	容量	備考
LAMP 用プラスミド	50 µl x 1	形状： 10 mM Tris-HCl（pH8.0）, 1 mM EDTA 使用可能なプライマーミックス： SSIIb陽性対照用, CBH351 検出用

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使用例

GM トウモロコシCBH351 定性試験用試薬（プライマーミックス、および陽性コントロールプラスミド）を用いて、LAMP 反応およびアガロースゲル電気泳動を行った。

Step 1: 反応混合液の準備

LAMP反応にはNEW ENGLAND BioLabs社 Bst DNA Polyemrase Large Fragmentおよび添付の反応バッファーを使用するか、または栄研化学株式会社Loopamp® DNA 増幅試薬キットを使用する。Loopamp® DNA増幅試薬キットに関しては、添付の製品説明書を十分ご参照の上、ご使用下さい。

例1 : 基本反応系
LAMP 用プライマーミックス	2.5 μl
Bst DNA Polymerase	16 units
10X ThermoPol buffer	2.5 μl
2.5 mmol/l each dNTPs	4.0 μl
5 mol/l Betaine	3.2 μl
100 mmol/l MgSO4	0.75 μl
H2O	up to 22.5 μl

例2 : Loopamp^®DNA増幅試薬キット(栄研化学株式会社製)を用いる場合
LAMP 用プライマーミックス	2.5 μl
2X Reaction Mix	12.5 μl
Bst DNA Polymerase	1 μl
H2O	up to 22.5 μl

Step 2: LAMP反応

M: OneSTEP Marker 11

Lane 1　CBH351 プライマーミックス
Lane 2　SSIIb プライマーミックス

試薬を融解し、反応混合液の調製（Step 1）を氷上で行う。
反応チューブに反応混合液を22.5 µl 分注する。
2.5 μl の鋳型DNA（サンプルDNAまたはCBH351陽性コントロールプラスミド）を添加し、よく混合する。
サンプルDNA溶液は、検体からのDNA抽出液を100 ng/µlに希釈して用いる。
65°Cで1 時間インキュベートする。
反応液を80°Cで2 ～ 5 分間熱処理し、酵素を失活させる。
反応液2 µl をアガロースゲル（2 ～ 3％を推奨）を用いて電気泳動し、増幅の有無を確認する。

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