Code No. 製品名 包装単位 希望納入価格312-06791 ISOIL Large for Beads ver.2 8回用 24,000円
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ISOIL Large for Beads ver.2 は 5 g の土壌サンプルからDNA を抽出するためのキットであり、既存品 ISOIL Large for Beads に 2 つのオプションプロトコールを加え、より充実した内容にバージョンアップしました。
≪2 つのオプションプロトコール≫
① 再精製プロトコール これまでのプロトコールでは精製が不十分だった特殊なサンプルについても、高純度な土壌 DNA を調製することが出来ます。 ② スケールアップ(20g サンプル処理)プロトコール 微量しか DNA が含有していない土壌サンプルに対して、20g までのスケールアップが可能です。
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Beads Tubes 8本Lysis Solution BB 80 ml ×1本Lysis Solution 20S 4 ml ×1本Purification Solution 45 ml ×1本Precipitation Solution 90 ml ×1本Wash Solution 45 ml ×1本Ethachinmate 100 µl ×1本TE(pH 8.0) 10 ml ×1本マニュアル 1部
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抽出ステップ
- 土壌 試料を Beads Tube にいれる
←Lysis Solution BB 、 Lysis Solution 20S 添加 , ボルテックス (最高速度、 10 分間)
インキュベート (65℃ 、 60分間 )
遠心 (4,000 ×g , 5分間 , 室温)
- 上清を回収する
精製ステップ ←Purification Solution 添加 , 混合
←クロロホルム 添加 , ボルテックス ( 1分間)
遠心 (4,000 ×g , 15分間 , 室温)3.水層(上層)を回収する
←Precipitation Solution 添加
遠心 (8,000 ×g , 10分間 , 4℃)4.沈殿物 (DNA) を残し、上清を捨てる
←Wash Solution でリンスを行う
遠心 (8,000 ×g , 10分間 , 4℃)5.沈殿物を残し、上清を捨てる
←70% エタノール、Ethachinmate 添加、ボルテックス
遠心 (8,000 ×g , 10分間 , 4℃)6.沈殿物 (DNA) を残し、上清を捨てる
乾燥
←TE (pH.8.0に溶解)7.「精製ステップ」をもう一度行う
8.土壌 DNA 抽出完了
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【再精製プロトコールの効果】
東京大学 弥生圃場 対照区 (黒ボク土) 東北農業研究センター内圃場 畑 (黒ボク土)結果 再精製することで、より高純度の土壌 DNA が得られた。再精製プロトコルによる DNA の回収率は約70%。
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ISOIL、ISOIL for Beads Beating における土壌 DNA 抽出法は東京大学 TLO が特許出願中です。
ニッポンジーンは、土壌 DNA 抽出法に関して東京大学 TLO よりライセンスを受けています。