ISOHAIR実験例
MCT118型検査


MCT118座位は、第1染色体短腕部末端に位置する16塩基を繰り返し単位とするVNTR(variable number of tandem repeat)であり、個人によって繰り返し数が異なります。これを利用して、法医学資料からの個人識別などに用いられています。


実験例1

ISOHAIRを用いて、A、B、C 3人の毛根部6cmよりDNAを抽出し、得られたDNAの1/4量を使用して、MCT118座位をPCRにて増幅し、電気泳動を行いました。

Material and Method

PCR反応液
鋳型5 µl
10×Gene Taq Universal Buffer5 µl
dNTP4 µl
プライマー(Forward, 20pmol/µl)1 µl
プライマー(Reverse, 20pmol/µl)1 µl
d.d.H2O33.5 µl
Gene Taq NT0.5 µl

Total50 µl

PCR条件
94°C1 min.
94°C30 sec.30 cycles
64°C30 sec.
72°C2 min.
72°C5 min.

Result

MCT118型検査の結果1。人によりバンドパターンが全く異なる
  • M : Marker 5(φX174/Hinc II digest)
  • 1 : 試料A
  • 2 : 試料B
  • 3 : 試料C

Agarose 21, 3% gelで電気泳動


実験例2

IISOHAIRを用いて、父、母、子1、子2、他人の各々の毛根部1cm×2本よりDNAを抽出し、得られたDNAの1/4量を使用して、MCT118座位をPCRにて増幅し、電気泳動を行いました。

Material and Method

PCR条件
94°C1 min.
94°C15 sec.30 cycles
66°C15 sec.
72°C2 min.
72°C5 min.

Result

MCT118型検査の結果2。子は親の両方から1本ずつバンドを受け継いでいる
  • M : Marker 5(φX174/Hinc II digest)
  • 1 : 父
  • 2 : 母
  • 3 : 子1
  • 4 : 子2
  • 5 : 他人

Agarose 21, 3% gelで電気泳動


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