Mt1a mRNA, Rat
～RNA の 5' 末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を付加した均質なラット mRNA 標品～
Code No. |
製品名 |
包装単位 |
希望納入価格 |
| 311-06901 | Mt1a mRNA, Rat | 10µl (10ng/µl) |
32,000円 |
本品は、ラット metallothionein-1a 遺伝子の全長配列を有する RNA の 5'末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を付加した均質なラット mRNA 標品です。
本品を使用することで Real-Time PCR 実験の絶対量コントロールや、バリデーションコントロールを取るためのテンプレートとして用いることが可能です。
・5' 末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を持ちます。
・単一な遺伝子配列をもつ RNA です。
・世界初の生体内の mRNA を再現した単一の RNA 分子です。
・各種遺伝子発現解析の実験プロトコールの標準化をサポートします。
＊リアルタイム定量 RT-PCR のバリデーションコントロールに！
＊リアルタイム定量 RT-PCR の絶対量コントロールに！
本製品（ 108 copy ～ 103 copy 相当量 ) を 遺伝子特異的なプライマーとプローブを用いて 2step リアルタイム定量 PCR を行い、 Standard Curve を作成した 。
反応試薬： qPCR Mastermix Plus Low ROX
(EUROGENTEC社製品， Code No. 312-80431 )
使用機器： ABI PRISM® 7500 Fast
反応条件： Detection： 蛍光標識プローブ
Reaction Volume： 20µl
standard 7500 mode
（プライマー，プローブ配列は下記に記載）
Cycle Program 95°C 10 min 95°C 15 sec ×40 Cycles 60°C 1 min Standard Curve
0.999768
⇒R2 ＞ 0.99 となり高い定量性を示した。
Forward Primer 5'- AAA TAA TTT CCG GAC CAA CTC AGA -3' Reverse Primer 5'- TTC ACA TGC TCG GTA GAA AAC G -3' Double-Dye Probe 5'FAM- TCT TGC CGT ACA CCT CCA CCC AGT TTA CT -3'TAMRA ＊プライマー，プローブは ニッポン イージーティー にて合成したものを使用しております。
本Primer-Probe配列は、Complete RNAの検量線作成の実験のみに用いるため設計しました。そのため、残存ゲノムDNAを検出しないような領域に設計する考慮はしておりませんので、ご注意ください。
本製品を、変性アガロースゲルにて電気泳動を行い、純度を確認した。
M： RNA Ladder(0.125 - 6.0 k base) 1µl
1： 本製品 100 ng
2% Agarose S (ホルムアルデヒド変性ゲル）EtBr染色
100V 30min 電気泳動
本製品の配列は、Cap Site cDNA dT Rat Liver を鋳型とした PCR 産物に由来してお ります。
下記のリンクをクリックすると、塩基配列情報 (テキストファイル) をダウンロードで きます。・ Mt1a mRNA, Rat
[備考] 本製品の塩基配列は、〈GenBank〉Accession No,NM_138826 (Version,NM_138826.4 ) の配列と以下の3箇所が異なります。
1 ・ 7塩基目から9塩基目の「gga」は,NM_138826では存在しない。
2 ・ 5'側の6塩基および3'側の14塩基は製造上の理由で付加されている。
3 ・ 399塩基目から約50merの「a」が付加されている。
【参考文献】
Sakamoto, A., Imai, J., Nishikawa, A., Honma, R., Ito, E., Yanagisawa, Y., Kawamura, M., Ogawa, R., Watanabe, S.
Influence of inhalation anesthesia assessed by comprehensive gene expression profiling.
Gene 2005;356:39-48.
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