ISOPLANT使用例 (細菌からのDNA抽出)


1. 抽出DNAの収量と純度

ISOPLANT phenol/chloroform法
yeild (µg/g) A260/280 yeild (µg/g) A260/280
Anabaena variabilis
125-500
1.8
60-500
1.7
Bacillus amyloliquefaciens
250-500
1.8
1000
1.8
Bacillus subutillis
100
1.8
Escherichia coli
125-500
1.8
250
1.8
Haemophilus infuluenzae
250-1000
1.8
250
1.7
Nocardia corallina
125
1.8
125
1.7
Pseudomonas aeruginosa
80-125
1.8
Staphylococcus aureus
125
1.9
125
1.7
Streptomyces phaeochromogenes
500
1.7
250
1.7
Thermus aquaticus
500
1.8
500
1.7
Xanthomonas holcicola
100
1.8
500
1.7

2. 抽出DNAの制限酵素反応

抽出DNAは、2〜20倍量の制限酵素(EcoR I及びHind III)で切断できることを確認した。

example2photo lane 1. Escherichia coli JM109
lane 2. Staphylococcus aureus 3A
lane 3. Pseudomonas aeruginosa
a : intact
b : EcoR I digest
c : Hind III digest
M : Marker 6 (λ/Sty I digest)

3. 抽出DNAのPCR

抽出DNAを鋳型としたPCRにて、特異的なバンドを増幅できることを確認した。

example3photo lane 1. Escherichia coli JM109
lane 2. Bacillus amyloliquefaciens
lane 3. Bacillus subutillis
lane 4. Staphylococcus aureus 3A
M : Marker 6 (λ/Sty I digest)

植物からのDNAの抽出 酵母からのDNAの抽出 放線菌、カビからのDNAの抽出


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