| トラブル |
対策 |
| 毛髪が溶けない。 |
- プロトコール＊6) 後、さらにEnzyme Solutionを5µl加え、55°Cでインキュベートする。
- 毛髪が溶け残ってしまう場合、完全溶解しなくてもDNAが溶出しているので、そのまま以後の操作を行う。
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| 得られたDNAを電気泳動してもバンドが確認できない。 |
- 毛髪から得られるDNA量は、個人によって、あるいは同一人物でも毛髪一本一本によって差がある。また、1本の毛髪でも毛根部と毛幹部では差がある。毛髪(特に毛幹部)からDNAを抽出する場合、得られたDNAが微量であるために電気泳動を行ってもゲル上でバンドを確認できない場合があるので、そのままPCRのステップへ進めてみる。→使用例「毛髪から得られるDNA量」参照。
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| DNA溶液が着色している。 |
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| PCRを行っても全く増幅しない。 |
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| 増幅産物がスメアリングする。 |
- Taq DNA Polymeraseの量を減らす。
- テンプレートの量を増やす。
- 変性温度を高くする。
- プライマーを長くする。→使用例「PCR条件」参照。
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| 目的のバンドと異なるものが増幅される。 |
- プライマーの設計を変える。
- 毛髪をよくエタノール洗浄してから抽出する。
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