ISOGENⅡ

Code No.	製品名	包装単位	希望納入価格	備考
311-07361	ISOGENⅡ	100 ml	28,000円
317-07363		10 ml	9,000円

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ISOGENⅡ（アイソジェンⅡ）は、動物組織および培養細胞からのtotal RNAおよびsmall RNA抽出用試薬です。 本品は、フェノールとグアニジンを含む均一な液体であり、細胞成分との相互作用により、シングルステップでRNA を単離できます。 従来法の試薬（ISOGEN やISOGEN-LS）のようにクロロホルムを用いた液相分離の必要がありません。 試料にISOGENⅡを加えて溶解またはホモジナイズした後、水を添加すると、DNA、タンパク質、ポリサッカライド等は沈殿（不溶化）するため、遠心分離によって除去できます（右図）。上清をエタノール沈殿、洗浄、溶解すると、高純度なRNA が単離できます。 お知らせ（2010.10.01） ISOGEN Ⅱのプロトコール「small RNA の単離」において、共沈剤として Ethachinmate よりも Glycogen を使用した方がより効果的に収量が得られることが分かりましたので、プロトコールを変更しました。（ISOGEN Ⅱ マニュアル（第二版） 、実験例 Data 4参照）

・ RNA の単離にクロロホルムを使用しない。
・ 従来法の試薬（ISOGEN など）よりもsmall RNAの抽出効率が良い。
・ 高分子RNA（＞200 bases）と、small RNA（＜200 bases）を分画できる（分画しない方法もある）。
・ DNAの混入が少なく、抽出したRNAはそのままRT-PCRや定量RT-PCRに使用可能。
・ 約1時間でRNAが抽出可能。

Code No.	製品名	構成品
311-07361	ISOGENⅡ	ISOGENⅡ	100ml
		マニュアル	1部
317-07363	ISOGENⅡ	ISOGENⅡ	10ml
		マニュアル	1部

冷蔵保存

・お買い求めになった日から6ヶ月以内にご使用下さい。
・本品は室温で送付しております。製品到着後、2～10℃で保存していただくことにより、問題なくご使用いただけます。

• 本品は、試験研究用試薬ですので、医薬品、その他の目的にはご使用になれません。また、試薬についての基本的な知識のある方以外は取り扱わないで下さい。
• ISOGENⅡは医薬用外劇物（フェノール製剤）ですので、取り扱いにはご注意下さい。
• ご使用の際には適切な保護具（手袋、眼鏡等）を着用して下さい。
• 蒸気を吸入しないようにし、換気を十分に行って下さい。
• 目に入ったり皮膚に付着したりした場合は、大量の水で少なくとも15分間は洗い流し、医師の診察を受けて下さい。
• 本品の取り扱いは、マニュアル記載内容通りに行って下さい。
• マニュアル記載内容と異なった取り扱いによるトラブルにつきましては、弊社では責任を負いかねます。

MSDS一覧ページへ

　ISOGENⅡマニュアル（第二版） （100ml包装に添付）

　ISOGENⅡマニュアル（第二版） （10ml包装に添付）

• 本品以外にRNaseフリー水、エタノール、イソプロパノールを用意する。
• チューブは透明なポリプロピレン製を用いるとよい。使用前に、遠心分離の強度（12K×g）とISOGENⅡ（フェノール）に対する耐性があるか確認しておく。
• 全ての操作は室温で行えるが、遠心は4～28℃で行うことを勧める。
  
  

プロトコール 「高分子RNAの単離」 および 「total RN の単離」で得られる RNA の収量の目安は次の通りであった。

試料		高分子 RNA の単離	total RNA の単離
組織	肝臓	5～7 µg RNA/mg tissue	6～8 µg RNA/mg tissue
	腎臓、脾臓	3～4 µg RNA/mg tissue	3～4 µg RNA/mg tissue
	骨格筋、脳、肺	0.5～1.5 µg RNA/mg tissue	0.5～1.5 µg RNA/mg tissue
	胎盤	1～3 µg RNA/mg tissue	1～3 µg RNA/mg tissue
培養細胞	上皮細胞	5～8 µg RNA/106 cells	5～10 µg RNA/106 cells
	繊維芽細胞	3～5 µg RNA/106 cells	4～6 µg RNA/106 cells

 

 

　　　 植物からのtotal RNA抽出例

　　　 植物からの高分子RNAおよびsmall RNAの単離例

ISOGENⅡ

1. Chomczynski, P. ： Reagents and methods for isolation of purified RNA, US and International Patents Pending.
2. Chomczynski, P. and Sacchi, N.：”Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol- chloroform extraction”, Anal. Biochem., 162, 156-159（1987）
3. Chomczynski, P.：”A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples”, Biotechniques, 15, 532-537（1993）
4. Wilfinger, W., Mackey, K. and Chomczynski, P.：”Effect of pH and ionic strength on the spectrophotometric assessment of nucleic acid purity”, Biotechniques, 22, 474-481（1997）

Code No.	製品名	容量	価格
315-02504	ISOGEN	10 ml	5,600円
317-02503		50 ml	19,000 円
311-02501		100 ml	28,000 円
317-02623	ISOGEN-LS	10 ml	5,600 円
311-02621		100 ml	32,000 円
318-01793	Ethachinmate	0.02 ml	3,200 円
312-01791		0.2 ml	15,000 円
316-90101	Distilled Water, Deionized, Sterile	100 ml	4,000 円
318-90105		500 ml	9,000 円
312-90103		100 ml×6	15,600 円
312-90201	DEPC treated Water	100 ml	4,000 円
314-90205		500 ml	9,000 円
318-90203		100 ml×6	15,600 円
314-90021	TE（pH 8.0）	100 ml	4,000 円
316-90025		500 ml	9,000 円
310-90023		100 ml×6	15,600 円

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