ISOGEN
ISOGEN-LS

RNA抽出用試薬

ISOGEN/ISOGEN-LSとPoly (A)+ RNA精製キットをセットにした「ISOGEN/ISOGEN-LS Poly(A)+ Isolation Pack」もございます。

• フェノール及びチオシアン酸グアニジンを主成分とした均一溶液
• 液層分離の際に便利な着色溶液(ISOGEN : 青色、ISOGEN-LS : 赤色)
• 一連の操作でRNA、DNA、タンパク質の単離が可能
• 簡単、迅速 (RNA単離時間 : 約1時間、DNA : +2時間、タンパク質 : +2.5時間)
• 高回収率
• 組織や培養細胞などの試料にはISOGEN、血液等のように、容量が大きくさらに濃縮の面倒な液体試料にはISOGEN-LS

2〜10°C

• 本品は、開封後なるべく早く(お買い求めになった日から6ヶ月以内に)ご使用ください。
• 本品に変色が認められた場合には、使用しないでください。
• 弊社では本品を室温で送付しておりますが、製品到着後ただちに2〜10°Cで保存していただくことにより問題なくご使用いただけます。

• 本品は試験研究用試薬ですので、医薬品、その他の目的にはご使用になれません。また、試薬についての基本的な知識のある方以外は取り扱わないでください。
• ISOGEN及びISOGEN-LSは医薬用外劇物(フェノール製剤)ですので、お取り扱いにはご注意ください。
• ご使用の際には適切な保護具(手袋、眼鏡等)を着用してください。
• もし目に入ったり皮膚に付着した場合は、大量の水で少なくとも15分間は洗い流し、医師の診察を受けてください。
• 本品のお取り扱いは、マニュアル記載内容通りに行って下さい。
• マニュアル記載内容と異なったお取り扱いによるトラブルにつきましては、弊社では責任を負いかねます。

　製品安全データシート(MSDS)は下記のページからダウンロードできます。
[[製品安全データシート集]]

1) Chomczynski, P. and Sacchi, N.: Anal.Biochem., 162, 156 (1987)
2) Chomczynski, P.: BioTechniques, 15, 532 (1993)
3) Chomczynski, P., Bowser-Finn, R. and Sabatini, N.: The Jounal of NIH Research, 6,83 (1994)
4) Chomczynski, P. and Mackey, K., BioTechniques, 19, 942-945 (1995)

Licensed by Molecular Research Center Inc.

製品マニュアルをご覧になる際にはAdobe Acrobat® Readerが必要です。

　平成18年7月4日改訂版

改定前のマニュアルにつきましては マニュアル正誤表 をご覧下さい。(2006.8.31）

ISOGEN法の原理

ISOGEN及びISOGEN-LSは、ヒト、動物、植物及び細菌からのRNA抽出用試薬である。液相分離による方法を用いており、同一試料からDNA、タンパク質も単離することが可能である。一連の操作で、RNA、DNA、タンパク質を単離できるので、貴重な試料に有効であり、また、操作が簡単なので、試料数が多い場合にも便利である。 　ISOGEN及びISOGEN-LSは、フェノールとチオシアン酸グアニジンを含む均一な液体である。ISOGENは組織や培養細胞等の試料に、ISOGEN-LSは血液等、容量が大きく（＞100µl:1.5mlプラスチックチューブで処理する場合）、さらに濃縮が面倒な液体試料に有効である。ISOGEN-LSはISOGENを液体試料用に改良したもので、ISOGENよりもフェノール含量が多くなっている。試料に加えるISOGEN-LSの量比が異なる以外はISOGENと同じである。試料にISOGENまたはISOGEN-LSを加えて溶解またはホモジナイゼーションした後、クロロホルムを加えて遠心分離するとホモジネートは水相、有機相及び中間相の3相に分離する。水相にはRNAのみが存在し、DNAとタンパク質は中間相以下に存在する。従って、まず、水相を採取してイソプロパノールを加えてRNAを沈殿させ、残った中間相と有機相にエタノールを加えてDNAを、さらに、イソプロパノールを加えてタンパク質を沈殿させることによりRNA、DNA及びタンパク質を順次単離することができる。
		図1　ISOGEN法の原理

[RNAの単離]

　ISOGENまたはISOGEN-LSを用いてRNAを単離すると、約1時間で無傷のRNAを高収率で単離することができる。得られたRNAは、DNAやタンパク質の混入がほとんどなく、DNaseなどの処理をしなくてもそのままノーザン分析、ドットブロットハイブリダイゼーション等に用いることができる。

• プロトコール1-1　RNAの単離
• プロトコール1-2　微量試料からのRNAの単離
• プロトコール1-3　植物からのRNAの単離
• トラブルシューティング

[DNAの単離]

　DNAは[プロトコール1-1　RNAの単離, 1-2　微量試料からのRNAの単離, 1-3　植物からのRNAの単離]のホモジナイゼーション後の遠心分離で得られる中間相と有機相より回収する。単離されたDNAは、PCRや制限酵素の基質として用いることができる。
　ただし、[プロトコール1-1, 1-2, 1-3]で得られた中間相や有機層中に多量の不溶物(カス状、繊維状のもの等)がある場合、得られるDNAの収量が少ない、あるいは純度が低いことがあるのでDNAの単離には適さない。

• プロトコール2　DNAの単離
• トラブルシューティング

[タンパク質の単離]

タンパク質は、[プロトコール2　DNAの単離]のエタノール沈殿の遠心分離で得られる上清の有機相より回収する。単離されたタンパク質は、そのままウエスタンブロッティングに用いることができる。

• プロトコール3　タンパク質の単離
• トラブルシューティング
  

実験例はこちらから

・ISOGENを用いたグラム陽性菌からのRNA抽出
・ISOGEN/ISOGEN-LSを用いた酵母からのRNA抽出
・ISOGENを用いた骨からのRNA抽出

関連製品

・ISOGEN Poly(A)+ Isolation Pack ・ISOGEN-LS Poly(A)+ Isolation Pack

（ISOGENまたはISOGEN-LSとPoly(A)+RNAを精製するためのPoly(A)+ Isolation Packのセット。）

[Code No./容量]　[特長]　[保存条件]　[使用上の注意]　[参考文献]　[製品添付マニュアル]　[ISOGEN法の原理]　[プロトコール, トラブルシューティング]　[使用例]

[Product List]
[Back To Top Page]