EcoR I Methylase

製品概要

　EcoR I Methylaseは制限酵素EcoR Iと同一の認識塩基配列を持ち、その認識配列の5'側から2番目のA(アデニン)をメチル化する反応を触媒する酵素である。メチル化されたDNAは、EcoR Iで切断されなくなる。

製品仕様

起源：Escherichia coli RY13
活性：40〜100units/µl
単位の定義：1unitは1µgのλDNAを37°C、60分間でEcoR Iによる切断から保護するのに必要な酵素活性とする。
形状：200nmol/l NaCl, 100mmol/l りん酸カリウム(pH 7.4), 0.1mmol/l EDTA, 10mmol/l 2-Mercaptoethanol, 0.2mg/ml BSA, 50% Glycerol
酵素反応条件：100mmol/l NaCl, 100mmol/l Tris-HCl(pH 8.0), 10mmol/l EDTA, 80µmol/l S-Ademosylmethionine, 37°C
添付の酵素反応用バッファー(1ml×1本)は酵素反応条件の10倍濃度である。例えば反応容量が50µlの場合には酵素反応専用バッファーを5µl加える。
純度：本酵素100unitsと1µgのλ/Hind IIIフラグメントを37°C、16時間、制限酵素EcoR Iの反応条件で反応させても、アガロースゲル電気泳動パターンに変化は認められない。
備考：S-Ademosylmethionine(10mmol/l)は製品に添付されているので、酵素反応条件に従って添加する。

文献

1)Cheng, S. C., Kim, R., King, K., Kim, S-H., and Modrich, P. : J. Biol. Chem., 259, 11571(1984)
2)Rubin, R. A. and Modrich, P. : J. Biol. Chem., 252, 7265(1977)

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