DNA Polymerase I (E.coli)

製品概要

　DNA Polymerase I (E.coli)は、鋳型DNAおよびプライマー存在下で5'→3'方向へのヌクレオチドの重合反応を触媒する酸系である。また本酵素は、一本鎖DNAに選択的に働く3'→5'エキソヌクレアーゼ活性と、二本鎖DNAに選択的に働く5'→3'エキソヌクレアーゼ活性を持つ。

製品仕様

起源：Escherichia coli lysogen for NM964 (λ pol A)
活性：5〜15units/µl
単位の定義：1unitは、d(A-T)copolymerをプライマー/鋳型として、37°C、30分間に10nmolのデオキジヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性とする。
形状：50mmol/l りん酸カリウム(pH7.4), 1mmol/l DTT, 50% Glycerol
酵素反応条件：50mmol/l Tris-HCl(pH7.8), 10mmol/l MgCl2, 0.1mmol/l DTT, 50µg/ml BSA, 37°C
製品には酵素反応条件の10倍濃度の酵素反応専用バッファー(1ml×1本)と20倍濃度のBSA(1mg/ml, 0.5ml)が添付されている。例えば反応容量が50µlの場合には酵素反応専用バッファー5µlとBSAを2.5µl加える。
純度：本酵素10unitsと1µgのφX174 RF I DNAを、37°C、1時間反応させても、アガロースゲル電気泳動パターンに変化は認められない。

文献

1) Kelley, W. S. and Stump, K. H. : J. Biol. Chem., 254, 3206(1979)
2) Kelley, W. S., Chalmers, K. and Murray, N. E. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 74, 5632(1977)
3) Murray, N. E. and Kelley, W. S. : Mol. Gen. Genet., 175, 77(1979)

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